凍存管作為生物樣本低溫保存的核心載體,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞庫(kù)、基因庫(kù)、臨床檢驗(yàn)及生物醫(yī)藥研發(fā)中。其正確使用不僅關(guān)乎樣本活性與完整性,更直接影響實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性與數(shù)據(jù)可靠性。若操作不當(dāng),極易引發(fā)樣本污染、管體爆裂、信息混淆或反復(fù)凍融損傷等風(fēng)險(xiǎn)。掌握
凍存管科學(xué)、規(guī)范的使用流程,是守護(hù)珍貴生物資源的關(guān)鍵步驟。

一、選用合規(guī)凍存管
材質(zhì)要求:必須使用高純度聚丙烯(PP)材質(zhì)、耐-196℃低溫的專(zhuān)業(yè)凍存管,確保在液氮或超低溫環(huán)境下不脆裂;
密封性能:優(yōu)選帶硅膠O型圈或雙重密封蓋設(shè)計(jì),防止冷凝水滲入或樣本揮發(fā);
容量匹配:常見(jiàn)0.5mL、1.8mL、2.0mL等規(guī)格,液體填充量不超過(guò)管體80%(如1.8mL管最多裝1.4mL),預(yù)留冷凍膨脹空間。
二、規(guī)范標(biāo)記與信息錄入
標(biāo)識(shí):使用耐低溫記號(hào)筆在管壁書(shū)寫(xiě),或采用激光刻碼、二維碼標(biāo)簽,嚴(yán)禁僅貼紙質(zhì)標(biāo)簽(易脫落、模糊);
信息完整:包含樣本編號(hào)、類(lèi)型、凍存日期、操作者、項(xiàng)目名稱(chēng)等關(guān)鍵字段;
同步電子記錄:立即錄入LIMS(實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng))或電子表格,實(shí)現(xiàn)雙備份追蹤。
三、樣本分裝與預(yù)處理
無(wú)菌操作:在生物安全柜內(nèi)完成分裝,避免微生物污染;
添加保護(hù)劑:對(duì)活細(xì)胞等敏感樣本,需加入10%DMSO或甘油等冷凍保護(hù)劑,減少冰晶損傷;
程序降溫:將凍存管先置于-80℃冰箱或?qū)S贸绦蚪禍睾校ㄈ鏜r.Frosty)中,以約-1℃/min速率緩慢冷凍,再轉(zhuǎn)移至長(zhǎng)期存儲(chǔ)設(shè)備。
四、凍存與取用操作規(guī)范
豎直放置:凍存管必須垂直插入凍存盒孔位,確保密封蓋朝上,防止泄漏;
快速操作:從超低溫環(huán)境取出時(shí)動(dòng)作迅速,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫;
一次性使用原則:解凍后未用完的樣本不可再次凍存,防止反復(fù)凍融導(dǎo)致核酸降解或細(xì)胞死亡。